Diantara punca kemandulan ialah disebabkan lelaki tidak subur atau tidak mempunyai jumlah sperma yang mencukupi sebagaimana lelaki normal.
Masaalah kesuburan atau kekurangan sperma lelaki dapat diperbaiki melalui pengambilan ekstrak delima. Sekumpulan pengkaji yang terdiri daripada Maja D. K. Fedder dan rakan-rakan dari Laboratory of Reproductive Biology, Scientific Unit, Regional Hospital of Horsens, Horsens, Denmark, University of Southern Denmark dan beberapa universiti lain telah menjalankan kajian terhadap potensi ekstrak buah delima untuk meningkatkan jumlah sperma pada lelaki yang mengalami masaalah kekurangan sperma.
Hasil kajian itu mendapati penggunaan ekstrak delima bersama Alpinia Galangga telah meningkatkan pertambahan sperma sebanyak 62% sekali gus memperbaiki tahap kesuburan lelaki.
Di bawah iakah hasil kajian mereka:
Ekstrak Biji Delima dan Galangal Rhizome Meningkatkan Bilangan Sperma Motil: Ujian Prospektif, Rawak, Dikawal, Double-Blinded
Oleh: Maja D. K. Fedder, 1 Henrik B. Jakobsen, 2 Ina Giversen, 2 Lars P. Christensen, 3 Erik T. Parner, 4 and Jens Fedder 1 , 5 ,
Author information
Abstrak
Buah delima (Punica granatum) dan galangal (Alpinia galanga) secara berasingan telah dibuktikan berupaya merangsang spermatogenesis dan meningkatkan jumlah sperma dan motilitas pada tikus.
Di dalam perubatan tradisional, buah delima telah lama digunakan untuk meningkatkan kesuburan, namun kajian mengenai kesan spermatogenesis pada manusia tidak pernah diterbitkan. Dengan kajian ini, kami mengkaji sama ada pengambilan secara oral tablet yang mengandungi jumlah ekstrak buah delima dan serbuk rimpang galangal (Punalpin) akan meningkatkan jumlah spermatozoa motil.
Kajian ini direka bentuk sebagai percubaan prospektif, rawak, terkawal, double-blinded. Pendaftaran adalah berdasarkan jumlah purata spermatozoa motil dari dua ejakulasi. Para peserta melakukan ejakulasi selepas pengambilan tablet 4-8 hari dan dua ejakulasi sebelum mereka berhenti mengambil tablet.
Seramai 70 orang lelaki dewasa dengan kualiti air mani yang tidak memenuhi piawaian untuk aplikasi komersil di Nordic Cryobank, tetapi tanpa azoospermia, menyertai kajian ini. Peserta mengambil tablet yang mengandungi ekstrak buah delima (piawaian berkenaan dengan punicalagin A + B, punicalin dan asid ellagic) dan rhizome kering beku galangal (diseragamkan dengan 1’S-1′-acetoxychavicol acetate) atau plasebo setiap hari selama tiga bulan.
Enam puluh enam peserta telah menyelesaikan rawatan (rawatan aktif: n = 34; plasebo: n = 32). Selepas rawatan, jumlah spermatozoa motil meningkat pada peserta yang dirawat dengan ekstrak tumbuhan berbanding dengan kumpulan plasebo (p = 0.026).
Selepas tiga bulan rawatan aktif, purata jumlah sperma motil meningkat sebanyak 62% (dari 23.4 kepada 37.8 juta), manakala bagi kumpulan plasebo, bilangan sperma motil meningkat sebanyak 20%. Morfologi sperma tidak terjejas oleh rawatan. Penemuan kami boleh membantu lelaki subfertil untuk mendapatkan jumlah sperma ejakulasi yang lebih baik dengan mengambil tablet yang mengandungi persediaan buah delima dan rimpang galangal yang lebih besar.
Pendaftaran Penyelidikan: ClinicalTrials.gov NCT01357044
PENGENALAN
Di dunia Barat, penurunan kualiti sperma selama 40 tahun yang lalu telah dicadangkan [1], [2], walaupun penurunan itu mungkin telah stabil pada dekad yang lalu [3]. Hanya 23% lelaki Denmark mempunyai kualiti air mani yang optimum dan 15% berisiko tinggi memerlukan rawatan kesuburan untuk membiasakan seorang kanak-kanak secara biologi [3]. Adalah jelas bahawa apa-apa penambahbaikan dalam kualiti air mani membawa peluang peningkatan untuk mendapatkan kehamilan, juga berkaitan dengan bantuan teknologi pembiakan. Suntikan sperma intrasitoplasmik sering merupakan satu-satunya alternatif yang ditawarkan kepada pasangan, di mana lelaki mengalami kualiti air mani yang rendah. Ini membuat percubaan terkawal rawak suplemen, ubat-ubatan atau nasihat diet, bertujuan untuk meningkatkan kualiti air mani, penting untuk membuat penyelesaian lain membantu lelaki dengan kualiti air mani yang rendah.
Buah Delima (Punica granatum) dan galangal (Alpinia galanga) tergolong dalam sekumpulan tumbuhan yang boleh dimakan, yang menunjukkan kesan yang menjanjikan dalam vivo pada kualiti sperma tikus tanpa menyebabkan kesan sampingan yang tidak diingini [4]–[7]. Buah buah delima terdiri daripada pericarp kulit yang mengandungi banyak biji, masing-masing diliputi oleh aril lilin yang berair. Kedua-dua pericarp dan jus aril mengandungi tanin hidrolisis, dengan pericarp menjadi sumber paling pekat [8]. Dalam pericarp, icalagainnins punicalagin A dan B mendominasi, manakala punicalin, yang merupakan produk hidrolisis separa punicalagin [9], membentuk pecahan kecil.
Ellagitannins hanya terdapat dalam jus aril [8]. Sebaliknya, tanin hidrolisis terdapat dalam jus bersama-sama dengan kumpulan lain polifenol penting, anthocyanin [10]. Ellagitannins dan anthocyanin mempunyai aktiviti antioksidan yang disebut di vitro [8]. Jus dari buah delima telah dibuktikan bertindak merangsang spermatogenesis, meningkatkan motilitas sperma, dan mengurangkan peratusan sperma yang tidak normal dalam tikus selepas tujuh minggu gavage [4]. Peningkatan motiliti dan kepekatan sperma bersama-sama dengan penurunan kadar sperma yang tidak normal diperhatikan selepas 6 minggu pengambilan secara oral ekstrak jus delima kepada tikus [5]. Tambahan pula pengambilan buah delima pericarp secara oral telah menunjukkan keberkesanan dalam membalikkan gangguan spermatogenik pada tikus[6]. Rhizome A. galanga seperti halia mengandungi pelbagai jenis sebatian yang serba boleh dan bahan yang mengandungi sekumpulan fenilpropanoid dengan 1’S-1′-acetoxychavicol asetat (ACA) yang paling banyak.
Fenilpropanoid telah menunjukkan aktiviti antioxidative yang kuat dalam vitro [11], manakala ekstrak rhizome A. galanga telah menunjukkan kesan anti-radang dalam vivo [12]. Tambahan pula, ekstrak rimpang A. galanga telah menunjukkan peningkatan sperma dan motilitas pada tikus [7] dan untuk meningkatkan kadar testosteron serum dalam tikus [13].
Dalam kajian ini diuji sama ada penggunaan oral tablet dengan kandungan standard extract delima dan serbuk A. galanga akan meningkatkan jumlah spermatozoa motif (TMSC) dan morfologi sperma, yang ditentukan oleh kriteria yang ketat, pada lelaki dewasa yang kurang kualiti air mani. Oleh kerana ini adalah kajian klinikal pertama yang menyiasat kesan delima dan A. galanga terhadap kualiti air mani, kami memilih untuk memberi tumpuan kepada parameter air mani (morfologi) yang paling penting (motif dan motilitas) [14] dan parameter air mani (morfologi) [15].
Bahan Dan Kaedah
Protokol untuk percubaan ini dan menyokong senarai semak CONSORT boleh didapati sebagai maklumat sokongan; lihat Checklist S1 dan Protocol S1.
Rekabentuk Kajian
Hipotesis telah dirumuskan sebelum kajian ini, dan dianggarkan dengan anggapan bahawa perbezaan antara kajian dan kelompok plasebo adalah 5 juta TMSC dan SD = 2.3 juta TMSC. Jika tahap penting sebanyak 5% dan kuasa statistik sebanyak 80% diberikan, sekurang-kurangnya 18 peserta harus dimasukkan ke dalam setiap kumpulan. Bagaimanapun, disebabkan tahap ketidakpastian yang tinggi dalam andaian dalam anggaran kuasa ini, hampir dua kali lebih ramai peserta didaftarkan.
Kajian ini adalah percubaan prospektif, rawak, placebo-controlled, double-blinded. Peserta rawak 1: 1 untuk rawatan harian dengan tablet yang mengandungi ekstrak buah delima (piawaian berkenaan dengan punicalagin A + B, punicalin dan asid ellagic) dan rhizome kering beku galangal (diseragamkan dengan 1’S-1 ‘-acetoxychavicol acetate (ACA)) atau tablet plasebo, selama 90 hari. Sebagai tambahan kepada dua ejakulasi yang dihantar sebelum rawatan (asas = min dua ejakulasi), para peserta melakukan ejakulasi selepas 4-8 hari pengambilan tablet dan dua ejakulasi pada akhir kajian. Selepas penamatan kajian itu, peserta menyiapkan soal selidik untuk menentukan berlakunya apa-apa kesan sampingan negatif atau positif.
Peserta Kajian Dan Pengambilan Air Mani
Para peserta telah direkrut sepanjang tempoh satu tahun dengan pengiklanan di Nordic Cryobank (bank sperma) dan akhabar tempatan. Kriteria penyertaan adalah: Lelaki dewasa yang berumur ≥18 tahun dengan kualiti air mani tidak memenuhi piawaian untuk permohonan komersial di Nordic Cryobank (iaitu 200 mio. TMSC dalam air mani mentah). Penderma sperma berpotensi, yang memenuhi keperluan, telah menyelesaikan soal selidik mengenai penyakit yang pernah dihidapi dan penggunaan ubat untuk memastikan bahawa punca kualiti air mani yang rendah tidak disebabkan oleh sebab-sebab perubatan yang jelas, seperti cryptorchidism atau jangkitan saluran genital.
Pendaftaran adalah berdasarkan dua ejakulasi yang diperolehi melalui aktiviti masturbasi dalam jangka masa 7-14 hari dan dengan selang selama 3-7 hari sebelum setiap penghantaran sampel. Air mani disimpan pada suhu bilik (max 30 ° C) dan dianalisis dalam masa satu jam dari ejakulasi. Peserta dengan azoospermia dikecualikan daripada kajian ini. Tujuh puluh peserta didaftarkan, tetapi empat memilih untuk menarik diri kerana kesulitan logistik.
Intervensi
Rawatan aktif harian terdiri daripada 4 tablet dengan ekstrak delima dan 4 tablet dengan A. galanga (Punalpin, Nerthus ApS, Lejre, Denmark), dua daripada setiap jenis diambil pada waktu pagi, dan dua dari setiap jenis pada waktu petang.
Tablet plasebo dihasilkan dalam dua variasi untuk memadankan secara visual kedua-dua jenis rawatan aktif. Empat daripada setiap jenis tablet plasebo diambil setiap hari, dua jenis setiap pagi dan dua setiap jenis petang. Peserta kedua-dua kumpulan menerima semua tablet pada awal kajian dalam dua bekas berasingan. Dos yang aktif harian diberikan 1000mg ekstrak delima dan 764mg A. galanga, sesuai dengan 500-1000 mL jus buah delima berkualiti tinggi (berdasarkan jumlah ciri ellagitannins) dan kira-kira 1g rhizome galangal segar (berdasarkan jumlah BPR). Untuk delima ini adalah: 106mg punicalagin A (27 mg / tablet), 278 mg punicalagin B (69 mg / tablet), 4,7 mg punicalin (1,2 mg / tablet) dan 9,6 mg asid ellagic (2,4 mg / tablet). Untuk A. galanga, ini berpadanan dengan: 16 mg ACA (3.9 mg / tablet).
Pemeriksaan awal dari pelbagai ekstrak komersial delima dan A. galanga untuk kandungan sifat-sifat ciri-ciri bioaktif menunjukkan bahawa kebanyakan ekstrak delima mempunyai sama ada:
(i) tahap yang sangat rendah punicalagin A dan B, punicalin dan asid ellagic atau
(ii) tahap rendah punicalagin A dan B dan punicalin,
tetapi paras asid ellagic yang tinggi, menunjukkan bahawa sebatian telah terdegradasi kepada asid ellagic. Ini adalah selaras dengan kajian Zhang et al. (2009) [16] yang menyaring 27 ekstrak komersil delima dan menyimpulkan bahawa hanya 5 mencerminkan profil tannin tipikal delima manakala lima ekstrak mempunyai tanin atau asid ellagic yang tidak dapat dikesan. Pemeriksaan kami menunjukkan bahawa ekstrak etanol (pomace) P40P (Polinat, Las Palmas, Sepanyol) mempunyai profil punicalagin A dan B, punicalin dan asid ellagic, yang sangat serupa dengan jus delima yang berkualiti tinggi (data tidak ditunjukkan ) dan oleh itu dipilih untuk penyelidikan ini. P40P telah diselaraskan untuk mengandungi sekurang-kurangnya 35% punicalagin A + B dan sekurang-kurangnya 40% punicosides (jumlah punicalagin, punicalin, glikosid asid ellagik dan asid ellagic).
Penyaringan beberapa ekstrak komersil A. galanga menunjukkan bahawa kandungan BPR adalah sangat rendah atau tidak dapat dikesan (data tidak ditunjukkan). Oleh itu, kami membangunkan kaedah berikut untuk menyediakan ekstrak A. galanga dengan tahap tinggi ACA digabungkan dengan jumlah mikrob yang sangat rendah: Rimpang segar A. galanga yang diimport dari Thailand telah dibeli (Europa Frugt ApS, Valby, Denmark). Rimpang tersebut disimpan pada kira-kira 5 °C semasa pengangkutan. Apabila ketibaan, batang dikeluarkan dan rizom berpecah longitudinal dan dipindahkan ke ruang pembekuan -24 ° C. Selepas beberapa hari pembekuan rimpang A. galanga menjadi beku-kering. Kandungan air dalam rizom adalah 3-5% selepas pengeringan. Rizom dipindahkan ke beg bertutup gas ketat (VMPET12/Adhesive/LLDPE100, total 114 µm, WJ Packaging solutions, Canada) dalam suasana nitrogen (0-3% O2) selama 14 hari. Selanjutnya beg foil dengan rizom diletakkan dalam ketuhar pemanas selama 3 jam pada suhu 78 ± 2 ° C untuk mengurangkan jumlah mikroorganisma. Sebelum dimasukkan ke dalam tablet, rizom kering diparut pada pengimpal berasaskan a standard Co-mill pulveriser
Tablet yang dihasilkan mengandungi 191mg daripada serbuk kering A. galanga atau 250mg ekstrak delima. Tablet delima juga mengandungi natrium bikarbonat, silikon dioksida, selulosa mikrokristalin, syloid AL1, magnesium stearate dan, untuk lapisan, propilena glikol, titanium dioksida, talc, dan pharmacoat 615.
Tablet A. galanga mengandungi talc, selulosa mikrocrystalline, syloid AL1, magnesium stearate, dan salutan ditambah dengan shellac dan kompleks tembaga klorofil untuk tujuan pewarna. Tablet placebo mengandungi 461mg selulosa microcrystalline, syloid AL 1 dan magnesium stearate plus coating, dan tablet plasebo yang sepadan dengan tablet A. galanga juga dicampurkan tembaga klorofil kompleks.
Tahap sebatian penanda pada tablet diukur 1, 5, 12 dan 21 bulan selepas pengeluaran untuk memantau sebarang kemerosotan.
HASILNYA
Hasil utama adalah perubahan dalam kualiti air mani selama tempoh rawatan selama 3 bulan, dari garis dasar hingga susulan, dinyatakan sebagai jumlah (sperma progresif dan tidak progresif) sperma (TMSC). TMSC ditakrifkan sebagai: Jumlah ejakulasi × kepekatan spermatozoa × peratusan spermatozoa motil [15].
Hasil sekunder adalah perubahan bilangan sperma morfologi normal berdasarkan kriteria morfologi sperma WHO [15]. Hasilnya dikira sebagai perbezaan antara nilai susulan dan nilai asas.
Analisis Kimia Keatas Tablet
Tahap ACA dalam tablet ditentukan oleh pengesanan pengionan ion kromatografi-api (GC-FID) dan spektrometri massa-kromatografi gas (GC-MS), manakala tahap punicalagin A dan B, punicalin, dan ellagic acid ditentukan oleh analitis kromatografi cecair berprestasi tinggi dengan pengesanan pelbagai diod (HPLC-DAD).
Untuk penyediaan sampel GC, 15 tablet diletakkan dalam mortar dan 5.00 g tablet dicampur dalam 50 mL 99.9% etanol dalam 100mL flask dengan penutup berskru. Campuran itu tertakluk kepada sonication bath selama 20 minit. Kira-kira 1mL ditapis melalui penapis HPLC (Whatman Puradisc 13 penapis picagari (0.2 μm), Sigma-Aldrich, Jerman) ke dalam GC-vials sebelum analisis GC-FID dan GC-MS. Analisis GC-FID dilakukan pada siri Agilent 6890 GC (Agilent Technologies, Hørsholm, Denmark) dan sistem Quadrupole GC / MS Single Thermo Scientific DSQ II (Thermo Scientific, CA, USA) digunakan untuk analisis GC-MS. Pemisahan dilakukan pada lajur plus ZB-Wax (diameter dalaman 60 m × 0.25 mm (id), df = fasa cecair 0.25 μm, Phenomenex Denmark, Værløse, Denmark) menggunakan program suhu ketuhar berikut: 80 ° C selama 1 minit, dari 80 ° C hingga 220 ° C pada 5 ° C / min, diikuti dengan suhu malar pada suhu 220 ° C selama 20 minit. Helium digunakan sebagai gas pembawa dengan kadar aliran 1.2 mL. Jumlah suntikan adalah 1 μL dengan nisbah pecahan 1:50 (suhu penyuntik 200 ° C). ACA dikenalpasti oleh GC-MS (70 eV) berdasarkan perbandingan waktu pengekalan (Rt) dan spektrum massa dengan piawaian autentik ACA (PhytoLab GmbH & Co. KG, Vestenbergsgreuth, Jerman) dan diukur oleh GC-FID pada 300 ° C) berdasarkan kurva penentukuran ACA yang meliputi pelbagai tumpuan yang berlaku dalam sampel. Semua analisis telah dilakukan dalam pendua dengan sisihan piawai relatif kurang daripada 1%.
Untuk penyediaan sampel HPLC, 15 tablet adalah dalam mortar dan 30 mg tablet dicampurkan dengan air sulingan 20 mL dalam flask dengan kedap udara bersaiz 50 mL. Campuran itu tertakluk kepada mandi sonication selama 20 minit. Sampel tablet terlarut telah ditapis melalui penapis HPLC (0.2 μm) sebelum analisis HPLC. Analisis HPLC-DAD analitik dijalankan pada sistem HPLC analisis Agilent 1200 Series (Hørsholm, Denmark) yang dilengkapi dengan operasi DAD dari 190 hingga 600 nm. Polifenol dipantau pada 258 nm, dan spektrum UV direkodkan antara 190 dan 600 nm. Pemisahan dilakukan pada Luna 3 μm C18 (2) 100 Å, lajur akhir LC (diameter dalaman 150 mm × 4.6 mm, saiz zarah 3 μm, Phenomenex Denmark, Værløse, Denmark). Fasa mudah alih terdiri daripada 0.2% asid fosfat dalam air sebagai pelarut A dan 100% asetonitril sebagai pelarut B, dan polifenol dipisahkan menggunakan kecerunan pelarut berikut: 0 min (5% B), 7 min (30% B), 8 min (70% B), 13 min (70% B), 15 min (5% B), dan 17 min (5% B). Pelarut telah digugurkan sebelum digunakan. Kadar aliran adalah 1.0 mL / min, suhu lajur adalah 40 ° C, dan isipadu suntikan adalah 10 μL. Larikan penyelesaian standard punicalagin A dan B (ChromaDex, Boulder, CO, Amerika Syarikat), punicalin (Stanford Chemicals, Irvine, CA, Amerika Syarikat), dan asid ellagic (Sigma-Aldrich, Munich, Jerman) metanol (80:20, v: v) pada kepekatan 1 mg / mL. Air digunakan untuk pencairan penyelesaian standard saham. Piawaian polifenol digunakan untuk pengenalan (Rt pada spektrum HPLC dan UV) dan kuantifikasi (lengkung penentukuran yang meliputi pelbagai tumpuan yang berlaku dalam sampel). Semua analisis telah dilakukan dalam pendua dengan sisihan piawai relatif kurang daripada 5%.
ANALISIS MOTILITI SPERMA
Bilangan sperma motil pada setiap sampel air mani ditentukan dengan menggunakan ruang pengiraan Makler (Sefi Medical Instruments Ltd., Haifa, Israel) oleh dua juruteknik makmal yang kedua-dua buta terhadap kajian ini. Setiap sampel air mani dibenarkan untuk mencairkan dan dianalisis dalam masa satu jam dari penghantaran. Kondisi semasa analisis diseragamkan kepada suhu bilik (22 ° C) dan mikroskop Leica yang dipanaskan. Sperma dalam sekurang-kurangnya 10 kotak grid dikira, dan ketika sekarang, sekurang-kurangnya 200 sperm per sampel dikira secara total. Koefisien variasi intra-pemerhati dinilai pada sela-sela dan tidak didapati melebihi perbezaan yang diterima antara bilangan replika bebas [15]. Dalam kes-kes bilangan replika, bacaan pertama dimasukkan dalam kajian ini.
ANALISIS MORFOLOGI SPERMA
Bilangan sperma morphologically normal ditentukan oleh blinded strict morphology analysis. Prosedur pembersihan dilakukan seperti yang disyorkan oleh edisi ke-5 WHO [15]. Pada setiap smear, jika ada, 400 sperma dikira dan dinilai sama ada normal atau normal berdasarkan kriteria morfologi sperma WHO [15]. Semua analisis morfologi dilakukan oleh orang yang sama dan dalam masa satu bulan untuk meminimumkan variasi penilaian.
RAMDOMISATION
Penyertaan peserta dilakukan oleh urutan blok-randomisation berasaskan komputer yang dibentuk dengan peruntukan 1: 1 dan blok 10, bermakna bahawa untuk setiap 10 peserta mendaftar bilangan peserta yang sama adalah rawak untuk setiap kumpulan. Tablet dengan sebatian aktif dan plasebo mempunyai penampilan yang sama. Tablet-tablet itu disimpan dalam bekas plastik berasingan dengan pengiraan berturut-turut yang sepadan dengan nombor penyertaan peserta. Para peserta memenuhi kriteria pemasukan yang menerima tablet apabila kembali mendapat persetujuan bertulis. Kod persepsi itu tidak diketahui sesiapa kecuali satu orang, yang menguruskan penyisihan, sehingga kajian selesai dan semua pengiraan statistik primer dilakukan.
Analisis Statistik
Analisis utama adalah perbandingan peningkatan purata TMSC antara kumpulan rawatan dan kumpulan plasebo. Peningkatan purata TMSC dibandingkan dengan menggunakan ujian t-varians yang tidak sama rata, dengan mengambil kira kemungkinan varians heterogenitas antara kedua-dua kumpulan dan sisihan dari taburan normal [17]. Sebagai analisis yang mengesahkan, kesemua 95% selang keyakinan dan p-nilai dikira oleh kaedah bootstrap [18]. Dalam penyelarasan analisis sekunder dibuat dalam model regresi linear untuk umur dan BMI, kedua-dichotomized oleh nilai median. Dalam analisis kepekaan pelarasan untuk umur dan BMI juga dilakukan menggunakan spline cubic yang terhad dengan setiap 2 knot dalam model regresi linear. Untuk semua analisis perbandingan, p <0.05 dianggap signifikan secara statistik.
Kelulusan
Kajian ini telah diluluskan oleh Agensi Perlindungan Data Denmark (J.nr. 2012-41-5441) dan Jawatankuasa Etika Saintifik Middle Jutland, Denmark (M-20100247) dan didaftarkan di ClinicalTrials.gov (ID NCT01357044). Semua peserta diberikan persetujuan bertulis.
KEPUTUSAN
Peserta kajian
Dari Mei 2011 hingga September 2012, 70 lelaki dewasa (umur purata: 29 tahun) termasuk dan rawak, dan 66 menerima rawatan aktif (n = 32) atau plasebo (n = 34), Figure 1. Umur min bagi kumpulan yang menerima Rawatan aktif adalah 30 ± 7 tahun, dan bagi golongan yang menerima rawatan plasebo, usia minima adalah 28 ± 6 tahun. Indeks jisim badan (BMI) dan faktor gaya hidup tidak banyak berbeza antara dua kumpulan (Table 1). Dalam setiap kumpulan, seorang peserta hanya mempunyai satu testis (yang lain mungkin diketepikan kerana cryptorchidism), dan dua peserta dalam setiap kumpulan melaporkan jangkitan klamidia sebelumnya. Lima puluh tiga peserta menyampaikan sampel air mani basil dengan sekurang-kurangnya satu parameter air mani yang tidak normal (volume, konsentrasi, motilitas) mengikut standard baru dari tahun 2010 (≥1.5 mL dan ≥15 juta / mL dan ≥40% spermatozoa motil) [15]. Satu peserta kajian dalam kumpulan rawatan hanya mempunyai satu tindak lanjut.
Jumlah Kiraan Sperma (TMSC)
Rawatan dengan jumlah piawai delima dan A. galanga untuk tiga bulan memperlihatkan peningkatan jumlah purata sperma motil sebanyak 62% (dari 23.4 juta hingga 37.8 juta) yang meningkat dengan ketara lebih tinggi daripada kumpulan plasebo 20%: dari 19.9 juta hingga 23.9 juta), p = 0.026 (Table 2). Analisis Bootstrap menunjukkan keputusan yang sangat serupa (p = 0.021). Figure 2 menunjukkan perbezaan plot individu antara garis asas tindakan lanjut dan TMSC. Tiada peningkatan sperma motil selepas satu minggu pengambilan tablet bagi mana-mana kumpulan (Table 2). Apabila data diselaraskan untuk umur dan BMI (menggunakan bahagian di median), perbezaan dalam peningkatan TMSC kekal signifikan secara statistik (Table 2). Hasil yang sama diperoleh apabila menyesuaikan umur atau BMI menggunakan spline padu terhad (data tidak ditunjukkan).
Table 2: Jumlah motil sperma (TMSC).
Walaupun ditakrifkan sebagai kualiti air mani biasa, ia telah menunjukkan bahawa masa kehamilan meningkat, apabila kepekatan sperma tidak melebihi 40 × 106 / mL [19]. Subanalyses dalam dataset kami menunjukkan trend yang jelas peningkatan yang lebih besar dalam TMSC dalam kumpulan rawatan aktif berbanding dengan kumpulan plasebo ketika melihat peserta dengan TMSC baseline yang sangat rendah. Kepentingan statistik dikekalkan apabila melihat subkumpulan peserta dengan TMSC asas pada atau di bawah 40 juta (rawatan aktif: n = 27, plasebo: n = 28) (p = 0.02), namun disebabkan oleh bilangan peserta dalam kajian, kuasa statistik hilang apabila TMSC garis dasar terus diturunkan.
Untuk dinyatakan sebagai hasil sekunder, kuasa tidak mencukupi untuk menunjukkan kesan yang mungkin pada motilitas (sperma motil peratus) sahaja (p = 0.2), tetapi kepekatan spermatozoa motil juga meningkat dengan ketara dalam kumpulan rawatan aktif berbanding dengan plasebo ( p = 0.030; 3.8 mio./mL dalam rawatan aktif berbanding 1.1 mio./mL dalam plasebo).
Dua peserta dalam kumpulan rawatan mengalami gejala seperti influenza semasa tempoh kajian. Bagi kedua-dua peserta ini, TMSC tidak bertambah baik.
Morfologi Sperma
Penilaian morfologi sperma yang ketat tidak mendedahkan perbezaan yang signifikan secara statistik antara rawatan dan kumpulan plasebo (Table 3). Keputusan yang sangat serupa diperolehi menggunakan ujian t-varians yang tidak sama (Table 3) dan kaedah bootstrap (data tidak ditunjukkan).
PEMATUHAN DAN KESELAMATAN
Aktiviti mikrobiologi ekstrak delima dan A. galanga adalah di bawah piawaian EU untuk ubat herba, walaupun sebelum prosedur pemanasan yang digunakan A. galanga, yang seterusnya menurunkan jumlah mikrobiologi (data tidak ditunjukkan).
Mengira tablet yang tinggal di semua botol pada akhir kajian menunjukkan lebih daripada 85% peserta mengambil lebih daripada 80% tablet. Tiga puluh lapan (57.6%) peserta mengembalikan soal selidik mengenai kesan sampingan dan keadaan kesihatan semasa tempoh kajian. Mungkin tidak berkaitan dengan rawatan, tiga daripada responden (dua dalam kumpulan rawatan dan satu di kumpulan plasebo) melaporkan gejala seperti influenza. Satu peserta dari kumpulan rawatan aktif melaporkan kesan sampingan dalam bentuk buang air besar yang tidak teratur, cirit-birit, dan perut kembung, tetapi tetap ingin menyelesaikan rawatan.
Tanda Aras Kompound
Jumlah BPR dalam tablet dikurangkan pada tempoh pemantauan. Tahap awal BPR dikurangkan dengan kira-kira 50% 21 bulan selepas pengeluaran tablet (Figure 3). Tahap punicalagin A dan B, punincalin dan asid ellagik dalam tablet delima tidak berubah dalam tempoh yang sama (data tidak ditunjukkan). Sejak pengambilan, dan oleh itu titik permulaan untuk peserta, akan datang, peserta yang diambil pertama mengambil tablet dengan kandungan ACA yang lebih tinggi dalam komposisi A. galanga. Bagi 34 peserta yang pertama termasuk, purata peningkatan dalam jumlah sperma biasa adalah 74% (p = 0.045) (data tidak ditunjukkan), berkemungkinan mencerminkan jumlah BAK yang lebih tinggi.
PERBINCANGAN
Kajian ini menunjukkan gabungan kompound buah Delima dan A. galanga (Punalpin) dengan ketara meningkatkan jumlah sperma motil pada lelaki dengan kualiti air mani yang berkurangan atau rendah dalam lingkungan normal, selepas tiga bulan rawatan harian.
Gerakan sperma yang matang dari testis ke epididimis, di mana mereka menghabiskan purata enam hari sebelum ejakulasi [20]. Memandangkan tiada perbezaan bilangan sperma motil dilihat selepas minggu pertama pengambilan ekstrak delima dan serbuk A. galanga, kami mencadangkan gabungan itu memberikan kesan positifnya semasa spermatogenesis dan bukannya pada persekitaran epididim. Ini selaras dengan kajian tikus Türk et al., Yang menyimpulkan bahawa jus buah delima merangsang spermatogenesis, meningkatkan motilitas sperma dan menurunkan jumlah sperma yang tidak normal dalam tikus dalam cara yang bergantung kepada dos [4]..
Walau bagaimanapun, mekanisme di sebalik penambahbaikan yang diperhatikan dalam kualiti air mani masih perlu dijelaskan. Satu faktor yang boleh menyumbang dengan ketara kepada kesan yang diperhatikan adalah tahap antioksidan yang tinggi di kedua-dua herba itu. Beberapa kajian telah menunjukkan pengurangan yang signifikan dalam aktiviti antioksidan enzim dan bukan enzim dalam plasma mani lelaki yang tidak subur berbanding dengan lelaki subur dan pengaruh positif pengambilan antioksidan terhadap kualiti air mani pada manusia [21], [22]. Di samping itu, penggunaan jus buah atau buah delima telah mengakibatkan peningkatan ketara dalam kapasiti antioksidan plasma [23], [24]. Akhir sekali, walaupun tidak dibuktikan sebagai faktor penyebab, beberapa kajian menunjukkan perhubungan statistik antara pengambilan buah-buahan dan sayur-sayuran dan menurunkan risiko kualiti air mani [25], [26].
KEKUATAN DAN BATASAN
Kajian ini dibuat dengan kukuh. Walau bagaimanapun, rangkaian yang agak luas dalam nilai asas di kalangan peserta merupakan kelemahan kajian. Dengan populasi kajian yang lebih homogen, selang keyakinan 95% terhadap perubahan dalam TMSC dijangka akan berkurang, diikuti dengan hasil statistik yang lebih kukuh.
Ia juga merupakan kelemahan kajian bahawa kadar kehamilan bukanlah natalamat hasil kajian, sebab para peserta tidak direkrut berdasarkan keinginan untuk kehamilan.
Terakhir, maklumat tentang tahap spesies oksigen reaktif dan kapasiti antioksidan akan sangat relevan.
PERBANDINGAN DENGAN KAJIAN LAIN
Untuk pengetahuan kita, kajian pertama untuk melihat kesan delima dan A. galanga terhadap kualiti sperma pada lelaki, magnitud kesan hanya boleh dibandingkan dengan kajian klinikal keatas manusia pada suplemen lain. Kajian-kajian ini terutamanya menilai kesan-kesan antioksidan.
Polifenol dalam delima menunjukkan aktiviti antioksidan yang ketara dalam vitro [10]. Mansour et al. menguji ekstrak delima kepada tikus dan menyarankan penurunan yang diamati pada tingkat malondialdehid, suatu produk sampingan dari peroxidation lipid, boleh dikaitkan dengan kadar penurunan sperma yang tidak normal dan peningkatan motilitas sperma, iaitu perlindungan antioksidan yang melindungi membran sel sperma dari peroxidation lipid [5].
Walaupun banyak kajian telah membincangkan persoalan sama ada pengambilan antioksidan lisan memang bermanfaat untuk kualiti air mani [22], beberapa penulis kajian dan kajian baru-baru ini menyimpulkan bahawa lebih banyak kajian yang dirancang dengan lebih baik diperlukan di kawasan ini. Walau bagaimanapun, walaupun kekurangan konsensus di antara kajian dan kekurangan bukti untuk penambahbaikan parameter hasil yang paling penting iaitu kadar kehamilan, majoriti kajian mendapati kesan positif terhadap pelbagai antioksidan pada kualiti air mani, terutamanya diukur oleh kepekatan sperma dan motilitas [27]–[29].
Baru-baru ini, pengambilan oral suplemen pelbagai antioksidan didapati mengurangkan jumlah immotile sperma tetapi dengan ketara meningkatkan TMSC pada lelaki yang menjalani rawatan kesuburan [30]. Dalam kajian lain, pengambilan harian bijan didapati telah meningkatkan jumlah sperma dan motilitas [31]. Dalam kedua-dua kajian ini, selang analisis air mani dari garis dasar untuk tindakan susulan adalah sekurang-kurangnya dua bulan, tidak memberi sebarang maklumat sama ada suplemen itu mempunyai kesan ke atas sperma epididim. Walau bagaimanapun, kedua-dua kajian merujuk kepada kesan antioksidan sebagai sebab utama peningkatan kualiti sperma. Dalam kajian mengenai kesan bijan pada kualiti sperma, morfologi sperma juga dinilai, tetapi menurut penemuan semasa kita tidak ada peningkatan dalam morfologi sperma selepas tiga bulan mengambil suplemen bijan [31].
Beberapa kajian telah menunjukkan bahawa tekanan oksidatif dalam cairan seminal, iaitu tahap kelebihan spesies oksigen reaktif (ROS) berbanding dengan tahap antioksidan, menyebabkan penurunan kualiti sperma melalui dua mekanisme:
Sesetengah ROS bertindak sebagai radikal bebas dan menyebabkan kerosakan kepada membran sel sperma dengan itu mengurangkan motilitas sperma dan radikal bebas boleh menyebabkan kerosakan kepada DNA sperma [22]. Kedua-dua Delima dan A. galanga mengandungi tahap antioksida yang signifikan yang dapat menjelaskan sepenuhnya kesan yang dilihat dalam kajian ini terhadap kualiti sperma. Aktiviti antioksidan delima mungkin disebabkan polifenol yang banyak terdapat di dalam buahnya kerana struktur kimianya menunjukkan bahawa mereka boleh bertindak sebagai antioksidan langsung dan tidak langsung. Ketiadaan bio dari polifenol, bagaimanapun, menjadi kebimbangan utama apabila membicarakan kesan antioksidan langsung sebatian ini kerana kepekatan dalam sistem sistemik seringkali terlalu rendah untuk mempunyai sebarang kesan antioksidan langsung yang ketara dalam vivo.
Oleh itu, kesan pencegahan polifenol terhadap, contohnya, tekanan oksidatif mungkin berkaitan dengan kemampuan mereka untuk mengaktifkan sistem pertahanan antioksidan endogen; oleh itu bertindak sebagai antioksidan tidak langsung. Polifenol yang mengandungi kumpulan orto-fenol seperti yang terdapat dalam buah delima boleh dimetabolismakan oleh enzim fasa 2 kepada ortho-quinones elektrofilik, yang merupakan prasyarat untuk mengaktifkan sistem pertahanan antioksidan endogen [32], [33]. Oleh itu, sifat antioksidan polifenol yang paling banyak pada buah delima dijangka disebabkan oleh aktiviti antioksidan tidak langsung.
Oleh itu, hakikat bahawa TMSC tidak meningkat selepas kira-kira satu minggu pengambilan tablet dalam kajian ini tidak membuktikan terhadap kesan antioksidan kombinasi buah-buahan delima dan A. galanga. Ia mencadangkan kesan yang mungkin terhadap antioksidan tidak langsung. Di samping itu, polyphenols delima juga boleh memberi kesan pengubahsuaian dalam sel melalui tindakan terpilih pada komponen berlainan daripada cascade isyarat intraselular seperti kawalan hormon dan protein yang penting untuk fungsi selular seperti pertumbuhan dan percambahan [34], [35].. Ini juga boleh menjelaskan kesan yang diperhatikan dari ekstrak buah delima dan campuran galanga.
Adapun polifenol dalam delima, penyusun bioaktif utama A. galanga, 1’S-1′-acetoxychavicol asetat (ACA), juga bertindak sebagai antioksidan tidak langsung, walaupun struktur kimia tidak berkaitan dengan polifenol delima. ACA juga merupakan elektrofil yang kuat [36], yang nampaknya menjelaskan banyak bioaktiviti yang dilaporkan dari produk semulajadi ini. ACA telah ditunjukkan untuk meningkatkan aktiviti enzim fasa 2 dan mengawal selia metabolisme glutathione dengan mengaktifkan sistem pertahanan antioksidan endogen [37]–[40] penting untuk kesan antitumor dan chemopreventive [36], [41]–[46].
KESIMPULAN DAN KAJIAN MASA HADAPAN
Kajian ini menunjukkan bahawa pengambilan tablet mengandungi persediaan ekstrak delima dan A. galanga (Punalpin) boleh membantu lelaki dalam mendapatkan jumlah sperma ejakulasi yang lebih baik.
Analisis kimia yang dijalankan keatas tablet tersebut mengesahkan kehadiran beberapa sebatian bioaktif yang berpotensi, contohnya antioksidan, namun pada masa ini kita tidak tahu, mungkin sebatian ini mungkin bertanggungjawab untuk peningkatan TMSC. Selain itu, ia masih belum dikaji sama ada kesan gabungan delima dan A. galanga adalah sinergi atau tambahan.
Mekanisme di mana gabungan delima dan A. galanga menyebabkan peningkatan jumlah sperma motil harus diselidiki dalam kajian masa depan, di mana juga kadar kehamilan dan masa kehamilan haruslah diambil perkiraan. Kajian semacam itu diharapkan menjustifikasi syor produk komersial dalam amalan klinikal.
PENGHARGAAN
Sebahagian daripada kajian ini telah dibentangkan di European Society of Human Reproduction in London pada 7 hingga 10 Julai 2013.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada juruteknik makmal Trine Matthäi from Laboratory of Reproductive Biology, Horsens Hospital, and Thomas Ebbesen from Nordic Cryobank, Aarhus, Denmark, untuk melakukan analisis air mani. Kajian ini dibiayai oleh Centre for Science and Research of Alternative Treatment (VIFAB), yang tidak memainkan peranan lain dalam kajian ini.
Penyata Pembiayaan
Kajian ini dibiayai oleh Pusat Sains dan Penyelidikan Rawatan Alternatif (VIFAB), yang tidak memainkan peranan lain dalam kajian ini. Pemberian nombor 1002282. VIFAB tidak wujud lagi. Nerthus ApS dimiliki oleh pengarang Ina Giversen (IG) dan Henrik Byrial Jakobsen (HBJ). Nerthus ApS tidak mempunyai peranan tambahan dalam reka bentuk kajian, pengumpulan data dan analisis, keputusan untuk menerbitkan, atau penyediaan manuskrip. Peranan khusus penulis ini diartikan dalam bahagian “sumbangan penulis”.
Ketersediaan Data
Penulis mengesahkan bahawa semua data yang mendasari penemuan itu tersedia sepenuhnya tanpa sekatan. Semua data yang berkaitan ada dalam kertas dan fail Penyokong Maklumat.
Artikel asal: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4190413/
Masaalah kesuburan atau kekurangan sperma lelaki dapat diperbaiki melalui pengambilan ekstrak delima. Sekumpulan pengkaji yang terdiri daripada Maja D. K. Fedder dan rakan-rakan dari Laboratory of Reproductive Biology, Scientific Unit, Regional Hospital of Horsens, Horsens, Denmark, University of Southern Denmark dan beberapa universiti lain telah menjalankan kajian terhadap potensi ekstrak buah delima untuk meningkatkan jumlah sperma pada lelaki yang mengalami masaalah kekurangan sperma.
Hasil kajian itu mendapati penggunaan ekstrak delima bersama Alpinia Galangga telah meningkatkan pertambahan sperma sebanyak 62% sekali gus memperbaiki tahap kesuburan lelaki.
Di bawah iakah hasil kajian mereka:
Ekstrak Biji Delima dan Galangal Rhizome Meningkatkan Bilangan Sperma Motil: Ujian Prospektif, Rawak, Dikawal, Double-Blinded
Oleh: Maja D. K. Fedder, 1 Henrik B. Jakobsen, 2 Ina Giversen, 2 Lars P. Christensen, 3 Erik T. Parner, 4 and Jens Fedder 1 , 5 ,
Author information
Abstrak
Buah delima (Punica granatum) dan galangal (Alpinia galanga) secara berasingan telah dibuktikan berupaya merangsang spermatogenesis dan meningkatkan jumlah sperma dan motilitas pada tikus.
Di dalam perubatan tradisional, buah delima telah lama digunakan untuk meningkatkan kesuburan, namun kajian mengenai kesan spermatogenesis pada manusia tidak pernah diterbitkan. Dengan kajian ini, kami mengkaji sama ada pengambilan secara oral tablet yang mengandungi jumlah ekstrak buah delima dan serbuk rimpang galangal (Punalpin) akan meningkatkan jumlah spermatozoa motil.
Kajian ini direka bentuk sebagai percubaan prospektif, rawak, terkawal, double-blinded. Pendaftaran adalah berdasarkan jumlah purata spermatozoa motil dari dua ejakulasi. Para peserta melakukan ejakulasi selepas pengambilan tablet 4-8 hari dan dua ejakulasi sebelum mereka berhenti mengambil tablet.
Seramai 70 orang lelaki dewasa dengan kualiti air mani yang tidak memenuhi piawaian untuk aplikasi komersil di Nordic Cryobank, tetapi tanpa azoospermia, menyertai kajian ini. Peserta mengambil tablet yang mengandungi ekstrak buah delima (piawaian berkenaan dengan punicalagin A + B, punicalin dan asid ellagic) dan rhizome kering beku galangal (diseragamkan dengan 1’S-1′-acetoxychavicol acetate) atau plasebo setiap hari selama tiga bulan.
Enam puluh enam peserta telah menyelesaikan rawatan (rawatan aktif: n = 34; plasebo: n = 32). Selepas rawatan, jumlah spermatozoa motil meningkat pada peserta yang dirawat dengan ekstrak tumbuhan berbanding dengan kumpulan plasebo (p = 0.026).
Selepas tiga bulan rawatan aktif, purata jumlah sperma motil meningkat sebanyak 62% (dari 23.4 kepada 37.8 juta), manakala bagi kumpulan plasebo, bilangan sperma motil meningkat sebanyak 20%. Morfologi sperma tidak terjejas oleh rawatan. Penemuan kami boleh membantu lelaki subfertil untuk mendapatkan jumlah sperma ejakulasi yang lebih baik dengan mengambil tablet yang mengandungi persediaan buah delima dan rimpang galangal yang lebih besar.
Pendaftaran Penyelidikan: ClinicalTrials.gov NCT01357044
PENGENALAN
Di dunia Barat, penurunan kualiti sperma selama 40 tahun yang lalu telah dicadangkan [1], [2], walaupun penurunan itu mungkin telah stabil pada dekad yang lalu [3]. Hanya 23% lelaki Denmark mempunyai kualiti air mani yang optimum dan 15% berisiko tinggi memerlukan rawatan kesuburan untuk membiasakan seorang kanak-kanak secara biologi [3]. Adalah jelas bahawa apa-apa penambahbaikan dalam kualiti air mani membawa peluang peningkatan untuk mendapatkan kehamilan, juga berkaitan dengan bantuan teknologi pembiakan. Suntikan sperma intrasitoplasmik sering merupakan satu-satunya alternatif yang ditawarkan kepada pasangan, di mana lelaki mengalami kualiti air mani yang rendah. Ini membuat percubaan terkawal rawak suplemen, ubat-ubatan atau nasihat diet, bertujuan untuk meningkatkan kualiti air mani, penting untuk membuat penyelesaian lain membantu lelaki dengan kualiti air mani yang rendah.
Buah Delima (Punica granatum) dan galangal (Alpinia galanga) tergolong dalam sekumpulan tumbuhan yang boleh dimakan, yang menunjukkan kesan yang menjanjikan dalam vivo pada kualiti sperma tikus tanpa menyebabkan kesan sampingan yang tidak diingini [4]–[7]. Buah buah delima terdiri daripada pericarp kulit yang mengandungi banyak biji, masing-masing diliputi oleh aril lilin yang berair. Kedua-dua pericarp dan jus aril mengandungi tanin hidrolisis, dengan pericarp menjadi sumber paling pekat [8]. Dalam pericarp, icalagainnins punicalagin A dan B mendominasi, manakala punicalin, yang merupakan produk hidrolisis separa punicalagin [9], membentuk pecahan kecil.
Ellagitannins hanya terdapat dalam jus aril [8]. Sebaliknya, tanin hidrolisis terdapat dalam jus bersama-sama dengan kumpulan lain polifenol penting, anthocyanin [10]. Ellagitannins dan anthocyanin mempunyai aktiviti antioksidan yang disebut di vitro [8]. Jus dari buah delima telah dibuktikan bertindak merangsang spermatogenesis, meningkatkan motilitas sperma, dan mengurangkan peratusan sperma yang tidak normal dalam tikus selepas tujuh minggu gavage [4]. Peningkatan motiliti dan kepekatan sperma bersama-sama dengan penurunan kadar sperma yang tidak normal diperhatikan selepas 6 minggu pengambilan secara oral ekstrak jus delima kepada tikus [5]. Tambahan pula pengambilan buah delima pericarp secara oral telah menunjukkan keberkesanan dalam membalikkan gangguan spermatogenik pada tikus[6]. Rhizome A. galanga seperti halia mengandungi pelbagai jenis sebatian yang serba boleh dan bahan yang mengandungi sekumpulan fenilpropanoid dengan 1’S-1′-acetoxychavicol asetat (ACA) yang paling banyak.
Fenilpropanoid telah menunjukkan aktiviti antioxidative yang kuat dalam vitro [11], manakala ekstrak rhizome A. galanga telah menunjukkan kesan anti-radang dalam vivo [12]. Tambahan pula, ekstrak rimpang A. galanga telah menunjukkan peningkatan sperma dan motilitas pada tikus [7] dan untuk meningkatkan kadar testosteron serum dalam tikus [13].
Dalam kajian ini diuji sama ada penggunaan oral tablet dengan kandungan standard extract delima dan serbuk A. galanga akan meningkatkan jumlah spermatozoa motif (TMSC) dan morfologi sperma, yang ditentukan oleh kriteria yang ketat, pada lelaki dewasa yang kurang kualiti air mani. Oleh kerana ini adalah kajian klinikal pertama yang menyiasat kesan delima dan A. galanga terhadap kualiti air mani, kami memilih untuk memberi tumpuan kepada parameter air mani (morfologi) yang paling penting (motif dan motilitas) [14] dan parameter air mani (morfologi) [15].
Bahan Dan Kaedah
Protokol untuk percubaan ini dan menyokong senarai semak CONSORT boleh didapati sebagai maklumat sokongan; lihat Checklist S1 dan Protocol S1.
Rekabentuk Kajian
Hipotesis telah dirumuskan sebelum kajian ini, dan dianggarkan dengan anggapan bahawa perbezaan antara kajian dan kelompok plasebo adalah 5 juta TMSC dan SD = 2.3 juta TMSC. Jika tahap penting sebanyak 5% dan kuasa statistik sebanyak 80% diberikan, sekurang-kurangnya 18 peserta harus dimasukkan ke dalam setiap kumpulan. Bagaimanapun, disebabkan tahap ketidakpastian yang tinggi dalam andaian dalam anggaran kuasa ini, hampir dua kali lebih ramai peserta didaftarkan.
Kajian ini adalah percubaan prospektif, rawak, placebo-controlled, double-blinded. Peserta rawak 1: 1 untuk rawatan harian dengan tablet yang mengandungi ekstrak buah delima (piawaian berkenaan dengan punicalagin A + B, punicalin dan asid ellagic) dan rhizome kering beku galangal (diseragamkan dengan 1’S-1 ‘-acetoxychavicol acetate (ACA)) atau tablet plasebo, selama 90 hari. Sebagai tambahan kepada dua ejakulasi yang dihantar sebelum rawatan (asas = min dua ejakulasi), para peserta melakukan ejakulasi selepas 4-8 hari pengambilan tablet dan dua ejakulasi pada akhir kajian. Selepas penamatan kajian itu, peserta menyiapkan soal selidik untuk menentukan berlakunya apa-apa kesan sampingan negatif atau positif.
Peserta Kajian Dan Pengambilan Air Mani
Para peserta telah direkrut sepanjang tempoh satu tahun dengan pengiklanan di Nordic Cryobank (bank sperma) dan akhabar tempatan. Kriteria penyertaan adalah: Lelaki dewasa yang berumur ≥18 tahun dengan kualiti air mani tidak memenuhi piawaian untuk permohonan komersial di Nordic Cryobank (iaitu 200 mio. TMSC dalam air mani mentah). Penderma sperma berpotensi, yang memenuhi keperluan, telah menyelesaikan soal selidik mengenai penyakit yang pernah dihidapi dan penggunaan ubat untuk memastikan bahawa punca kualiti air mani yang rendah tidak disebabkan oleh sebab-sebab perubatan yang jelas, seperti cryptorchidism atau jangkitan saluran genital.
Pendaftaran adalah berdasarkan dua ejakulasi yang diperolehi melalui aktiviti masturbasi dalam jangka masa 7-14 hari dan dengan selang selama 3-7 hari sebelum setiap penghantaran sampel. Air mani disimpan pada suhu bilik (max 30 ° C) dan dianalisis dalam masa satu jam dari ejakulasi. Peserta dengan azoospermia dikecualikan daripada kajian ini. Tujuh puluh peserta didaftarkan, tetapi empat memilih untuk menarik diri kerana kesulitan logistik.
Intervensi
Rawatan aktif harian terdiri daripada 4 tablet dengan ekstrak delima dan 4 tablet dengan A. galanga (Punalpin, Nerthus ApS, Lejre, Denmark), dua daripada setiap jenis diambil pada waktu pagi, dan dua dari setiap jenis pada waktu petang.
Tablet plasebo dihasilkan dalam dua variasi untuk memadankan secara visual kedua-dua jenis rawatan aktif. Empat daripada setiap jenis tablet plasebo diambil setiap hari, dua jenis setiap pagi dan dua setiap jenis petang. Peserta kedua-dua kumpulan menerima semua tablet pada awal kajian dalam dua bekas berasingan. Dos yang aktif harian diberikan 1000mg ekstrak delima dan 764mg A. galanga, sesuai dengan 500-1000 mL jus buah delima berkualiti tinggi (berdasarkan jumlah ciri ellagitannins) dan kira-kira 1g rhizome galangal segar (berdasarkan jumlah BPR). Untuk delima ini adalah: 106mg punicalagin A (27 mg / tablet), 278 mg punicalagin B (69 mg / tablet), 4,7 mg punicalin (1,2 mg / tablet) dan 9,6 mg asid ellagic (2,4 mg / tablet). Untuk A. galanga, ini berpadanan dengan: 16 mg ACA (3.9 mg / tablet).
Pemeriksaan awal dari pelbagai ekstrak komersial delima dan A. galanga untuk kandungan sifat-sifat ciri-ciri bioaktif menunjukkan bahawa kebanyakan ekstrak delima mempunyai sama ada:
(i) tahap yang sangat rendah punicalagin A dan B, punicalin dan asid ellagic atau
(ii) tahap rendah punicalagin A dan B dan punicalin,
tetapi paras asid ellagic yang tinggi, menunjukkan bahawa sebatian telah terdegradasi kepada asid ellagic. Ini adalah selaras dengan kajian Zhang et al. (2009) [16] yang menyaring 27 ekstrak komersil delima dan menyimpulkan bahawa hanya 5 mencerminkan profil tannin tipikal delima manakala lima ekstrak mempunyai tanin atau asid ellagic yang tidak dapat dikesan. Pemeriksaan kami menunjukkan bahawa ekstrak etanol (pomace) P40P (Polinat, Las Palmas, Sepanyol) mempunyai profil punicalagin A dan B, punicalin dan asid ellagic, yang sangat serupa dengan jus delima yang berkualiti tinggi (data tidak ditunjukkan ) dan oleh itu dipilih untuk penyelidikan ini. P40P telah diselaraskan untuk mengandungi sekurang-kurangnya 35% punicalagin A + B dan sekurang-kurangnya 40% punicosides (jumlah punicalagin, punicalin, glikosid asid ellagik dan asid ellagic).
Penyaringan beberapa ekstrak komersil A. galanga menunjukkan bahawa kandungan BPR adalah sangat rendah atau tidak dapat dikesan (data tidak ditunjukkan). Oleh itu, kami membangunkan kaedah berikut untuk menyediakan ekstrak A. galanga dengan tahap tinggi ACA digabungkan dengan jumlah mikrob yang sangat rendah: Rimpang segar A. galanga yang diimport dari Thailand telah dibeli (Europa Frugt ApS, Valby, Denmark). Rimpang tersebut disimpan pada kira-kira 5 °C semasa pengangkutan. Apabila ketibaan, batang dikeluarkan dan rizom berpecah longitudinal dan dipindahkan ke ruang pembekuan -24 ° C. Selepas beberapa hari pembekuan rimpang A. galanga menjadi beku-kering. Kandungan air dalam rizom adalah 3-5% selepas pengeringan. Rizom dipindahkan ke beg bertutup gas ketat (VMPET12/Adhesive/LLDPE100, total 114 µm, WJ Packaging solutions, Canada) dalam suasana nitrogen (0-3% O2) selama 14 hari. Selanjutnya beg foil dengan rizom diletakkan dalam ketuhar pemanas selama 3 jam pada suhu 78 ± 2 ° C untuk mengurangkan jumlah mikroorganisma. Sebelum dimasukkan ke dalam tablet, rizom kering diparut pada pengimpal berasaskan a standard Co-mill pulveriser
Tablet yang dihasilkan mengandungi 191mg daripada serbuk kering A. galanga atau 250mg ekstrak delima. Tablet delima juga mengandungi natrium bikarbonat, silikon dioksida, selulosa mikrokristalin, syloid AL1, magnesium stearate dan, untuk lapisan, propilena glikol, titanium dioksida, talc, dan pharmacoat 615.
Tablet A. galanga mengandungi talc, selulosa mikrocrystalline, syloid AL1, magnesium stearate, dan salutan ditambah dengan shellac dan kompleks tembaga klorofil untuk tujuan pewarna. Tablet placebo mengandungi 461mg selulosa microcrystalline, syloid AL 1 dan magnesium stearate plus coating, dan tablet plasebo yang sepadan dengan tablet A. galanga juga dicampurkan tembaga klorofil kompleks.
Tahap sebatian penanda pada tablet diukur 1, 5, 12 dan 21 bulan selepas pengeluaran untuk memantau sebarang kemerosotan.
HASILNYA
Hasil utama adalah perubahan dalam kualiti air mani selama tempoh rawatan selama 3 bulan, dari garis dasar hingga susulan, dinyatakan sebagai jumlah (sperma progresif dan tidak progresif) sperma (TMSC). TMSC ditakrifkan sebagai: Jumlah ejakulasi × kepekatan spermatozoa × peratusan spermatozoa motil [15].
Hasil sekunder adalah perubahan bilangan sperma morfologi normal berdasarkan kriteria morfologi sperma WHO [15]. Hasilnya dikira sebagai perbezaan antara nilai susulan dan nilai asas.
Analisis Kimia Keatas Tablet
Tahap ACA dalam tablet ditentukan oleh pengesanan pengionan ion kromatografi-api (GC-FID) dan spektrometri massa-kromatografi gas (GC-MS), manakala tahap punicalagin A dan B, punicalin, dan ellagic acid ditentukan oleh analitis kromatografi cecair berprestasi tinggi dengan pengesanan pelbagai diod (HPLC-DAD).
Untuk penyediaan sampel GC, 15 tablet diletakkan dalam mortar dan 5.00 g tablet dicampur dalam 50 mL 99.9% etanol dalam 100mL flask dengan penutup berskru. Campuran itu tertakluk kepada sonication bath selama 20 minit. Kira-kira 1mL ditapis melalui penapis HPLC (Whatman Puradisc 13 penapis picagari (0.2 μm), Sigma-Aldrich, Jerman) ke dalam GC-vials sebelum analisis GC-FID dan GC-MS. Analisis GC-FID dilakukan pada siri Agilent 6890 GC (Agilent Technologies, Hørsholm, Denmark) dan sistem Quadrupole GC / MS Single Thermo Scientific DSQ II (Thermo Scientific, CA, USA) digunakan untuk analisis GC-MS. Pemisahan dilakukan pada lajur plus ZB-Wax (diameter dalaman 60 m × 0.25 mm (id), df = fasa cecair 0.25 μm, Phenomenex Denmark, Værløse, Denmark) menggunakan program suhu ketuhar berikut: 80 ° C selama 1 minit, dari 80 ° C hingga 220 ° C pada 5 ° C / min, diikuti dengan suhu malar pada suhu 220 ° C selama 20 minit. Helium digunakan sebagai gas pembawa dengan kadar aliran 1.2 mL. Jumlah suntikan adalah 1 μL dengan nisbah pecahan 1:50 (suhu penyuntik 200 ° C). ACA dikenalpasti oleh GC-MS (70 eV) berdasarkan perbandingan waktu pengekalan (Rt) dan spektrum massa dengan piawaian autentik ACA (PhytoLab GmbH & Co. KG, Vestenbergsgreuth, Jerman) dan diukur oleh GC-FID pada 300 ° C) berdasarkan kurva penentukuran ACA yang meliputi pelbagai tumpuan yang berlaku dalam sampel. Semua analisis telah dilakukan dalam pendua dengan sisihan piawai relatif kurang daripada 1%.
Untuk penyediaan sampel HPLC, 15 tablet adalah dalam mortar dan 30 mg tablet dicampurkan dengan air sulingan 20 mL dalam flask dengan kedap udara bersaiz 50 mL. Campuran itu tertakluk kepada mandi sonication selama 20 minit. Sampel tablet terlarut telah ditapis melalui penapis HPLC (0.2 μm) sebelum analisis HPLC. Analisis HPLC-DAD analitik dijalankan pada sistem HPLC analisis Agilent 1200 Series (Hørsholm, Denmark) yang dilengkapi dengan operasi DAD dari 190 hingga 600 nm. Polifenol dipantau pada 258 nm, dan spektrum UV direkodkan antara 190 dan 600 nm. Pemisahan dilakukan pada Luna 3 μm C18 (2) 100 Å, lajur akhir LC (diameter dalaman 150 mm × 4.6 mm, saiz zarah 3 μm, Phenomenex Denmark, Værløse, Denmark). Fasa mudah alih terdiri daripada 0.2% asid fosfat dalam air sebagai pelarut A dan 100% asetonitril sebagai pelarut B, dan polifenol dipisahkan menggunakan kecerunan pelarut berikut: 0 min (5% B), 7 min (30% B), 8 min (70% B), 13 min (70% B), 15 min (5% B), dan 17 min (5% B). Pelarut telah digugurkan sebelum digunakan. Kadar aliran adalah 1.0 mL / min, suhu lajur adalah 40 ° C, dan isipadu suntikan adalah 10 μL. Larikan penyelesaian standard punicalagin A dan B (ChromaDex, Boulder, CO, Amerika Syarikat), punicalin (Stanford Chemicals, Irvine, CA, Amerika Syarikat), dan asid ellagic (Sigma-Aldrich, Munich, Jerman) metanol (80:20, v: v) pada kepekatan 1 mg / mL. Air digunakan untuk pencairan penyelesaian standard saham. Piawaian polifenol digunakan untuk pengenalan (Rt pada spektrum HPLC dan UV) dan kuantifikasi (lengkung penentukuran yang meliputi pelbagai tumpuan yang berlaku dalam sampel). Semua analisis telah dilakukan dalam pendua dengan sisihan piawai relatif kurang daripada 5%.
ANALISIS MOTILITI SPERMA
Bilangan sperma motil pada setiap sampel air mani ditentukan dengan menggunakan ruang pengiraan Makler (Sefi Medical Instruments Ltd., Haifa, Israel) oleh dua juruteknik makmal yang kedua-dua buta terhadap kajian ini. Setiap sampel air mani dibenarkan untuk mencairkan dan dianalisis dalam masa satu jam dari penghantaran. Kondisi semasa analisis diseragamkan kepada suhu bilik (22 ° C) dan mikroskop Leica yang dipanaskan. Sperma dalam sekurang-kurangnya 10 kotak grid dikira, dan ketika sekarang, sekurang-kurangnya 200 sperm per sampel dikira secara total. Koefisien variasi intra-pemerhati dinilai pada sela-sela dan tidak didapati melebihi perbezaan yang diterima antara bilangan replika bebas [15]. Dalam kes-kes bilangan replika, bacaan pertama dimasukkan dalam kajian ini.
ANALISIS MORFOLOGI SPERMA
Bilangan sperma morphologically normal ditentukan oleh blinded strict morphology analysis. Prosedur pembersihan dilakukan seperti yang disyorkan oleh edisi ke-5 WHO [15]. Pada setiap smear, jika ada, 400 sperma dikira dan dinilai sama ada normal atau normal berdasarkan kriteria morfologi sperma WHO [15]. Semua analisis morfologi dilakukan oleh orang yang sama dan dalam masa satu bulan untuk meminimumkan variasi penilaian.
RAMDOMISATION
Penyertaan peserta dilakukan oleh urutan blok-randomisation berasaskan komputer yang dibentuk dengan peruntukan 1: 1 dan blok 10, bermakna bahawa untuk setiap 10 peserta mendaftar bilangan peserta yang sama adalah rawak untuk setiap kumpulan. Tablet dengan sebatian aktif dan plasebo mempunyai penampilan yang sama. Tablet-tablet itu disimpan dalam bekas plastik berasingan dengan pengiraan berturut-turut yang sepadan dengan nombor penyertaan peserta. Para peserta memenuhi kriteria pemasukan yang menerima tablet apabila kembali mendapat persetujuan bertulis. Kod persepsi itu tidak diketahui sesiapa kecuali satu orang, yang menguruskan penyisihan, sehingga kajian selesai dan semua pengiraan statistik primer dilakukan.
Analisis Statistik
Analisis utama adalah perbandingan peningkatan purata TMSC antara kumpulan rawatan dan kumpulan plasebo. Peningkatan purata TMSC dibandingkan dengan menggunakan ujian t-varians yang tidak sama rata, dengan mengambil kira kemungkinan varians heterogenitas antara kedua-dua kumpulan dan sisihan dari taburan normal [17]. Sebagai analisis yang mengesahkan, kesemua 95% selang keyakinan dan p-nilai dikira oleh kaedah bootstrap [18]. Dalam penyelarasan analisis sekunder dibuat dalam model regresi linear untuk umur dan BMI, kedua-dichotomized oleh nilai median. Dalam analisis kepekaan pelarasan untuk umur dan BMI juga dilakukan menggunakan spline cubic yang terhad dengan setiap 2 knot dalam model regresi linear. Untuk semua analisis perbandingan, p <0.05 dianggap signifikan secara statistik.
Kelulusan
Kajian ini telah diluluskan oleh Agensi Perlindungan Data Denmark (J.nr. 2012-41-5441) dan Jawatankuasa Etika Saintifik Middle Jutland, Denmark (M-20100247) dan didaftarkan di ClinicalTrials.gov (ID NCT01357044). Semua peserta diberikan persetujuan bertulis.
KEPUTUSAN
Peserta kajian
Dari Mei 2011 hingga September 2012, 70 lelaki dewasa (umur purata: 29 tahun) termasuk dan rawak, dan 66 menerima rawatan aktif (n = 32) atau plasebo (n = 34), Figure 1. Umur min bagi kumpulan yang menerima Rawatan aktif adalah 30 ± 7 tahun, dan bagi golongan yang menerima rawatan plasebo, usia minima adalah 28 ± 6 tahun. Indeks jisim badan (BMI) dan faktor gaya hidup tidak banyak berbeza antara dua kumpulan (Table 1). Dalam setiap kumpulan, seorang peserta hanya mempunyai satu testis (yang lain mungkin diketepikan kerana cryptorchidism), dan dua peserta dalam setiap kumpulan melaporkan jangkitan klamidia sebelumnya. Lima puluh tiga peserta menyampaikan sampel air mani basil dengan sekurang-kurangnya satu parameter air mani yang tidak normal (volume, konsentrasi, motilitas) mengikut standard baru dari tahun 2010 (≥1.5 mL dan ≥15 juta / mL dan ≥40% spermatozoa motil) [15]. Satu peserta kajian dalam kumpulan rawatan hanya mempunyai satu tindak lanjut.
Table 1
Demographics and life style factors.
| Active treatment | Placebo | |
| (n = 32) | (n = 34) | |
| Age (years) | 30.6±7.3 (CI: 28.1–33.2) | 28.1±6.1 (CI: 26.1–30.2) |
| BMI | 25.8±3.8 (CI: 24.5–27.1) | 25.8±4.7 (CI: 24.2–27.4) |
| Smoking, n | 5 (15.6%) | 5 (14.7%) |
| Coffee drinking (≥4 cups/day), n | 9 (28.1%) | 3 (8.8%) |
| Alcohol drinking (≥14 units/week), n | 2 (6.3%) | 2 (5.9%) |
| Sauna regularly (monthly), n | 2 (6.3%) | 1 (2.9%) |
Demographic
data and life style factors of the participants showing a similar
pattern for the two study groups. Participants were asked to state basic
life style (smoking, coffee drinking, alcohol drinking and how often
they attended sauna). Age at the time of baseline ejaculate delivery was
calculated from social security numbers, and BMI was calculated from
given weights and heights.
Jumlah Kiraan Sperma (TMSC)
Rawatan dengan jumlah piawai delima dan A. galanga untuk tiga bulan memperlihatkan peningkatan jumlah purata sperma motil sebanyak 62% (dari 23.4 juta hingga 37.8 juta) yang meningkat dengan ketara lebih tinggi daripada kumpulan plasebo 20%: dari 19.9 juta hingga 23.9 juta), p = 0.026 (Table 2). Analisis Bootstrap menunjukkan keputusan yang sangat serupa (p = 0.021). Figure 2 menunjukkan perbezaan plot individu antara garis asas tindakan lanjut dan TMSC. Tiada peningkatan sperma motil selepas satu minggu pengambilan tablet bagi mana-mana kumpulan (Table 2). Apabila data diselaraskan untuk umur dan BMI (menggunakan bahagian di median), perbezaan dalam peningkatan TMSC kekal signifikan secara statistik (Table 2). Hasil yang sama diperoleh apabila menyesuaikan umur atau BMI menggunakan spline padu terhad (data tidak ditunjukkan).
Differences in total motile sperm counts (TMSCs).
Plot
of the differences in TMSCs from baseline to follow-up for each
participant in the active treatment receiving the combination of P. granatum fruit extract and A. galanga
rhizome powder and the placebo group. Follow-up – baseline (Y-axis)
represents the calculated differences in TMSC between the follow-up
TMSCs following 90 days of administration of either the dry preparation
of A. galanga and the P. granatum extract or the placebo and the corresponding TMSCs prior to administration (baseline). Horizontal bars indicate mean.
Table 2
Total motile sperm counts (TMSCs).
| Treatment | Crude | Adjusted | ||||
| Active | Placebo | |||||
| (n = 32) | (n = 34) | Difference | P-value* | Difference | P-value* | |
| Mean ±SD (95% CI) | Mean ±SD (95% CI) | |||||
| Baseline | 23.4±25.1 (14.3; 32.4) | 19.9±22.7 (12.0; 27.8) | 3.5 (−8.3; 15.3) | 0.56 | 4.4 (−8.2; 17.0) | 0.49 |
| Initiating treatment | 23.6±25.4 (14.4; 32.8) | 20.1±22.9 (12.1; 28.1) | 3.5 (−8.4; 15.4) | 0.56 | 4.7 (−8.0; 17.3) | 0.46 |
| Follow-up | 37.8±39.5 (23.6; 52.1) | 23.9±27.8 (14.2; 33.6) | 14.0 (−3.0; 30.9) | 0.10 | 14.2 (−3.8; 32.2) | 0.12 |
| Initiating treatment - baseline | 0.2±6.0 (−1.9; 2.4) | 0.2±9.9 (−3.3; 3.6) | 0.1 (−4.0; 4.1) | 0.98 | 0.3 (−3.9; 4.5) | 0.89 |
| Follow-up - baseline | 14.5±21.3 (6.8; 22.1) | 4.0±15.2 (−1.3; 9.3) | 10.5 (1.3; 1 9.7) | 0.026 | 9.8 (0.2; 19.5) | 0.047 |
TMSCs for the treatment groups receiving the combination of P. granatum fruit extract and A. galanga rhizome powder or placebo. The results are shown unadjusted and adjusted for age and BMI.
*The
difference in TMSC between the two groups was analysed by an unequal
variance t-test. In the adjusted analyses the participants were divided
in two groups at the median according to age and BMI.
Walaupun ditakrifkan sebagai kualiti air mani biasa, ia telah menunjukkan bahawa masa kehamilan meningkat, apabila kepekatan sperma tidak melebihi 40 × 106 / mL [19]. Subanalyses dalam dataset kami menunjukkan trend yang jelas peningkatan yang lebih besar dalam TMSC dalam kumpulan rawatan aktif berbanding dengan kumpulan plasebo ketika melihat peserta dengan TMSC baseline yang sangat rendah. Kepentingan statistik dikekalkan apabila melihat subkumpulan peserta dengan TMSC asas pada atau di bawah 40 juta (rawatan aktif: n = 27, plasebo: n = 28) (p = 0.02), namun disebabkan oleh bilangan peserta dalam kajian, kuasa statistik hilang apabila TMSC garis dasar terus diturunkan.
Untuk dinyatakan sebagai hasil sekunder, kuasa tidak mencukupi untuk menunjukkan kesan yang mungkin pada motilitas (sperma motil peratus) sahaja (p = 0.2), tetapi kepekatan spermatozoa motil juga meningkat dengan ketara dalam kumpulan rawatan aktif berbanding dengan plasebo ( p = 0.030; 3.8 mio./mL dalam rawatan aktif berbanding 1.1 mio./mL dalam plasebo).
Dua peserta dalam kumpulan rawatan mengalami gejala seperti influenza semasa tempoh kajian. Bagi kedua-dua peserta ini, TMSC tidak bertambah baik.
Morfologi Sperma
Penilaian morfologi sperma yang ketat tidak mendedahkan perbezaan yang signifikan secara statistik antara rawatan dan kumpulan plasebo (Table 3). Keputusan yang sangat serupa diperolehi menggunakan ujian t-varians yang tidak sama (Table 3) dan kaedah bootstrap (data tidak ditunjukkan).
Table 3
Sperm morphology.
| Treatment | ||||
| Active | Placebo | |||
| (n = 32) | (n = 34) | Difference | P-value* | |
| %±SD (95% CI) | %±SD (95% CI) | |||
| Baseline | 5.2±3.2 (4.0; 6.3) | 4.9±3.0 (3.8; 5.9) | 0.3 (−1.3; 1.9) | 0.70 |
| Follow-up | 5.4±3.4 (4.2; 6.7) | 5.0±2.8 (4.0; 5.9) | 0.5 (−1.1; 2.0) | 0.55 |
| Follow-up – baseline | 0.3±1.8 (−0.4; 0.9) | 0.1±1.8 (−0.6; 0.7) | 0.2 (−0.7; 1.1) | 0.71 |
Morphologically normal sperm for the treatment groups receiving the combination of P. granatum fruit extract and A. galanga rhizome powder or placebo.
*The difference in number of morphologically normal sperm between the two groups was analysed by an unequal variance t-test.
Table 3: Morfologi sperma.
Aktiviti mikrobiologi ekstrak delima dan A. galanga adalah di bawah piawaian EU untuk ubat herba, walaupun sebelum prosedur pemanasan yang digunakan A. galanga, yang seterusnya menurunkan jumlah mikrobiologi (data tidak ditunjukkan).
Mengira tablet yang tinggal di semua botol pada akhir kajian menunjukkan lebih daripada 85% peserta mengambil lebih daripada 80% tablet. Tiga puluh lapan (57.6%) peserta mengembalikan soal selidik mengenai kesan sampingan dan keadaan kesihatan semasa tempoh kajian. Mungkin tidak berkaitan dengan rawatan, tiga daripada responden (dua dalam kumpulan rawatan dan satu di kumpulan plasebo) melaporkan gejala seperti influenza. Satu peserta dari kumpulan rawatan aktif melaporkan kesan sampingan dalam bentuk buang air besar yang tidak teratur, cirit-birit, dan perut kembung, tetapi tetap ingin menyelesaikan rawatan.
Tanda Aras Kompound
Jumlah BPR dalam tablet dikurangkan pada tempoh pemantauan. Tahap awal BPR dikurangkan dengan kira-kira 50% 21 bulan selepas pengeluaran tablet (Figure 3). Tahap punicalagin A dan B, punincalin dan asid ellagik dalam tablet delima tidak berubah dalam tempoh yang sama (data tidak ditunjukkan). Sejak pengambilan, dan oleh itu titik permulaan untuk peserta, akan datang, peserta yang diambil pertama mengambil tablet dengan kandungan ACA yang lebih tinggi dalam komposisi A. galanga. Bagi 34 peserta yang pertama termasuk, purata peningkatan dalam jumlah sperma biasa adalah 74% (p = 0.045) (data tidak ditunjukkan), berkemungkinan mencerminkan jumlah BAK yang lebih tinggi.
Figure 3 ACA content in tablets.
Amount of 1′S-1′-acetoxychavicol acetate (ACA) in the A. galanga tablets within 21 months of production date.
PERBINCANGAN
Kajian ini menunjukkan gabungan kompound buah Delima dan A. galanga (Punalpin) dengan ketara meningkatkan jumlah sperma motil pada lelaki dengan kualiti air mani yang berkurangan atau rendah dalam lingkungan normal, selepas tiga bulan rawatan harian.
Gerakan sperma yang matang dari testis ke epididimis, di mana mereka menghabiskan purata enam hari sebelum ejakulasi [20]. Memandangkan tiada perbezaan bilangan sperma motil dilihat selepas minggu pertama pengambilan ekstrak delima dan serbuk A. galanga, kami mencadangkan gabungan itu memberikan kesan positifnya semasa spermatogenesis dan bukannya pada persekitaran epididim. Ini selaras dengan kajian tikus Türk et al., Yang menyimpulkan bahawa jus buah delima merangsang spermatogenesis, meningkatkan motilitas sperma dan menurunkan jumlah sperma yang tidak normal dalam tikus dalam cara yang bergantung kepada dos [4]..
Walau bagaimanapun, mekanisme di sebalik penambahbaikan yang diperhatikan dalam kualiti air mani masih perlu dijelaskan. Satu faktor yang boleh menyumbang dengan ketara kepada kesan yang diperhatikan adalah tahap antioksidan yang tinggi di kedua-dua herba itu. Beberapa kajian telah menunjukkan pengurangan yang signifikan dalam aktiviti antioksidan enzim dan bukan enzim dalam plasma mani lelaki yang tidak subur berbanding dengan lelaki subur dan pengaruh positif pengambilan antioksidan terhadap kualiti air mani pada manusia [21], [22]. Di samping itu, penggunaan jus buah atau buah delima telah mengakibatkan peningkatan ketara dalam kapasiti antioksidan plasma [23], [24]. Akhir sekali, walaupun tidak dibuktikan sebagai faktor penyebab, beberapa kajian menunjukkan perhubungan statistik antara pengambilan buah-buahan dan sayur-sayuran dan menurunkan risiko kualiti air mani [25], [26].
KEKUATAN DAN BATASAN
Kajian ini dibuat dengan kukuh. Walau bagaimanapun, rangkaian yang agak luas dalam nilai asas di kalangan peserta merupakan kelemahan kajian. Dengan populasi kajian yang lebih homogen, selang keyakinan 95% terhadap perubahan dalam TMSC dijangka akan berkurang, diikuti dengan hasil statistik yang lebih kukuh.
Ia juga merupakan kelemahan kajian bahawa kadar kehamilan bukanlah natalamat hasil kajian, sebab para peserta tidak direkrut berdasarkan keinginan untuk kehamilan.
Terakhir, maklumat tentang tahap spesies oksigen reaktif dan kapasiti antioksidan akan sangat relevan.
PERBANDINGAN DENGAN KAJIAN LAIN
Untuk pengetahuan kita, kajian pertama untuk melihat kesan delima dan A. galanga terhadap kualiti sperma pada lelaki, magnitud kesan hanya boleh dibandingkan dengan kajian klinikal keatas manusia pada suplemen lain. Kajian-kajian ini terutamanya menilai kesan-kesan antioksidan.
Polifenol dalam delima menunjukkan aktiviti antioksidan yang ketara dalam vitro [10]. Mansour et al. menguji ekstrak delima kepada tikus dan menyarankan penurunan yang diamati pada tingkat malondialdehid, suatu produk sampingan dari peroxidation lipid, boleh dikaitkan dengan kadar penurunan sperma yang tidak normal dan peningkatan motilitas sperma, iaitu perlindungan antioksidan yang melindungi membran sel sperma dari peroxidation lipid [5].
Walaupun banyak kajian telah membincangkan persoalan sama ada pengambilan antioksidan lisan memang bermanfaat untuk kualiti air mani [22], beberapa penulis kajian dan kajian baru-baru ini menyimpulkan bahawa lebih banyak kajian yang dirancang dengan lebih baik diperlukan di kawasan ini. Walau bagaimanapun, walaupun kekurangan konsensus di antara kajian dan kekurangan bukti untuk penambahbaikan parameter hasil yang paling penting iaitu kadar kehamilan, majoriti kajian mendapati kesan positif terhadap pelbagai antioksidan pada kualiti air mani, terutamanya diukur oleh kepekatan sperma dan motilitas [27]–[29].
Baru-baru ini, pengambilan oral suplemen pelbagai antioksidan didapati mengurangkan jumlah immotile sperma tetapi dengan ketara meningkatkan TMSC pada lelaki yang menjalani rawatan kesuburan [30]. Dalam kajian lain, pengambilan harian bijan didapati telah meningkatkan jumlah sperma dan motilitas [31]. Dalam kedua-dua kajian ini, selang analisis air mani dari garis dasar untuk tindakan susulan adalah sekurang-kurangnya dua bulan, tidak memberi sebarang maklumat sama ada suplemen itu mempunyai kesan ke atas sperma epididim. Walau bagaimanapun, kedua-dua kajian merujuk kepada kesan antioksidan sebagai sebab utama peningkatan kualiti sperma. Dalam kajian mengenai kesan bijan pada kualiti sperma, morfologi sperma juga dinilai, tetapi menurut penemuan semasa kita tidak ada peningkatan dalam morfologi sperma selepas tiga bulan mengambil suplemen bijan [31].
Beberapa kajian telah menunjukkan bahawa tekanan oksidatif dalam cairan seminal, iaitu tahap kelebihan spesies oksigen reaktif (ROS) berbanding dengan tahap antioksidan, menyebabkan penurunan kualiti sperma melalui dua mekanisme:
Sesetengah ROS bertindak sebagai radikal bebas dan menyebabkan kerosakan kepada membran sel sperma dengan itu mengurangkan motilitas sperma dan radikal bebas boleh menyebabkan kerosakan kepada DNA sperma [22]. Kedua-dua Delima dan A. galanga mengandungi tahap antioksida yang signifikan yang dapat menjelaskan sepenuhnya kesan yang dilihat dalam kajian ini terhadap kualiti sperma. Aktiviti antioksidan delima mungkin disebabkan polifenol yang banyak terdapat di dalam buahnya kerana struktur kimianya menunjukkan bahawa mereka boleh bertindak sebagai antioksidan langsung dan tidak langsung. Ketiadaan bio dari polifenol, bagaimanapun, menjadi kebimbangan utama apabila membicarakan kesan antioksidan langsung sebatian ini kerana kepekatan dalam sistem sistemik seringkali terlalu rendah untuk mempunyai sebarang kesan antioksidan langsung yang ketara dalam vivo.
Oleh itu, kesan pencegahan polifenol terhadap, contohnya, tekanan oksidatif mungkin berkaitan dengan kemampuan mereka untuk mengaktifkan sistem pertahanan antioksidan endogen; oleh itu bertindak sebagai antioksidan tidak langsung. Polifenol yang mengandungi kumpulan orto-fenol seperti yang terdapat dalam buah delima boleh dimetabolismakan oleh enzim fasa 2 kepada ortho-quinones elektrofilik, yang merupakan prasyarat untuk mengaktifkan sistem pertahanan antioksidan endogen [32], [33]. Oleh itu, sifat antioksidan polifenol yang paling banyak pada buah delima dijangka disebabkan oleh aktiviti antioksidan tidak langsung.
Oleh itu, hakikat bahawa TMSC tidak meningkat selepas kira-kira satu minggu pengambilan tablet dalam kajian ini tidak membuktikan terhadap kesan antioksidan kombinasi buah-buahan delima dan A. galanga. Ia mencadangkan kesan yang mungkin terhadap antioksidan tidak langsung. Di samping itu, polyphenols delima juga boleh memberi kesan pengubahsuaian dalam sel melalui tindakan terpilih pada komponen berlainan daripada cascade isyarat intraselular seperti kawalan hormon dan protein yang penting untuk fungsi selular seperti pertumbuhan dan percambahan [34], [35].. Ini juga boleh menjelaskan kesan yang diperhatikan dari ekstrak buah delima dan campuran galanga.
Adapun polifenol dalam delima, penyusun bioaktif utama A. galanga, 1’S-1′-acetoxychavicol asetat (ACA), juga bertindak sebagai antioksidan tidak langsung, walaupun struktur kimia tidak berkaitan dengan polifenol delima. ACA juga merupakan elektrofil yang kuat [36], yang nampaknya menjelaskan banyak bioaktiviti yang dilaporkan dari produk semulajadi ini. ACA telah ditunjukkan untuk meningkatkan aktiviti enzim fasa 2 dan mengawal selia metabolisme glutathione dengan mengaktifkan sistem pertahanan antioksidan endogen [37]–[40] penting untuk kesan antitumor dan chemopreventive [36], [41]–[46].
KESIMPULAN DAN KAJIAN MASA HADAPAN
Kajian ini menunjukkan bahawa pengambilan tablet mengandungi persediaan ekstrak delima dan A. galanga (Punalpin) boleh membantu lelaki dalam mendapatkan jumlah sperma ejakulasi yang lebih baik.
Analisis kimia yang dijalankan keatas tablet tersebut mengesahkan kehadiran beberapa sebatian bioaktif yang berpotensi, contohnya antioksidan, namun pada masa ini kita tidak tahu, mungkin sebatian ini mungkin bertanggungjawab untuk peningkatan TMSC. Selain itu, ia masih belum dikaji sama ada kesan gabungan delima dan A. galanga adalah sinergi atau tambahan.
Mekanisme di mana gabungan delima dan A. galanga menyebabkan peningkatan jumlah sperma motil harus diselidiki dalam kajian masa depan, di mana juga kadar kehamilan dan masa kehamilan haruslah diambil perkiraan. Kajian semacam itu diharapkan menjustifikasi syor produk komersial dalam amalan klinikal.
PENGHARGAAN
Sebahagian daripada kajian ini telah dibentangkan di European Society of Human Reproduction in London pada 7 hingga 10 Julai 2013.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada juruteknik makmal Trine Matthäi from Laboratory of Reproductive Biology, Horsens Hospital, and Thomas Ebbesen from Nordic Cryobank, Aarhus, Denmark, untuk melakukan analisis air mani. Kajian ini dibiayai oleh Centre for Science and Research of Alternative Treatment (VIFAB), yang tidak memainkan peranan lain dalam kajian ini.
Penyata Pembiayaan
Kajian ini dibiayai oleh Pusat Sains dan Penyelidikan Rawatan Alternatif (VIFAB), yang tidak memainkan peranan lain dalam kajian ini. Pemberian nombor 1002282. VIFAB tidak wujud lagi. Nerthus ApS dimiliki oleh pengarang Ina Giversen (IG) dan Henrik Byrial Jakobsen (HBJ). Nerthus ApS tidak mempunyai peranan tambahan dalam reka bentuk kajian, pengumpulan data dan analisis, keputusan untuk menerbitkan, atau penyediaan manuskrip. Peranan khusus penulis ini diartikan dalam bahagian “sumbangan penulis”.
Ketersediaan Data
Penulis mengesahkan bahawa semua data yang mendasari penemuan itu tersedia sepenuhnya tanpa sekatan. Semua data yang berkaitan ada dalam kertas dan fail Penyokong Maklumat.
Artikel asal: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4190413/
Labels:
punca kemandulan ialah disebabkan lelaki tidak subur
Thanks for reading Jus Delima Membantu Meningkatkan Kesuburan Lelaki. Please share...!
0 Comment for "Jus Delima Membantu Meningkatkan Kesuburan Lelaki"